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Marsu
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Maladie de Lyme précoce et test DNA

Message par Marsu »

http://www.medicalnewstoday.com/articles/183968.php
Many of the more than 30,000 people a year in the United States with suspected cases of Lyme disease spirochete (bacterial) infection can now take a DNA test developed by a Connecticut scientist/physician and his team that can quickly determine if they test positive for Lyme spirochetes in their blood. This is the first such early Lyme test available, and most insurance companies have already agreed to cover the cost for their members.

The scientific medical paper about the advanced test will be printed in the April 2010 edition of the "American Journal of Clinical Pathology."

"If people are infected with the Lyme spirochetes, and not treated quickly, thousands may suffer for many years from the debilitating effects of the disease. "But if, after infection, the bacteria are identified without delay, the patient can be effectively treated and totally cured," said Connecticut physician Sin Hang Lee, MD.

There have been other PCR tests for early Lyme disease. But this is the first effective one using nested PCR for detection and DNA sequencing to validate the molecular diagnosis, in clinical laboratory medicine. DNA sequencing is accepted as the gold standard for molecular identification, said Dr. Lee.

Dr. Lee, a pathologist, and his colleagues at Milford Hospital (Milford, CT) have developed the first highly sensitive and specific DNA test for the diagnosis of early Lyme disease before the traditional serology lab tests become positive. If the clinician awaits the rising Lyme disease antibody titers (which is normally the case) to make a diagnosis, the diagnosis of Lyme disease may be delayed, or even missed. The literature reports that up to 75% of the patients with acute-phase Lyme disease are negative for the characteristic antibodies, but in fact the percentage is higher, he said.

Lyme disease is spread by black-legged ticks, also known as deer ticks, and is most common in Connecticut, Massachusetts, Maryland, Minnesota, New Hampshire, New Jersey, Delaware, Pennsylvania, New York and Wisconsin, according to the Centers for Disease Control. The spirochete bacteria enter the skin at the location of the tick bite. After an incubation for 3-30 days, the bacteria travel through the skin and may spread to lymph nodes or travel through the bloodstream to other organs and other skin sites.

In technical terms, the new LoTemp® nested polymerase chain reaction (PCR) method detects a genomic DNA of the Lyme disease-causing spirochete in the blood, which is further validated by DNA sequencing. It is the marriage of both that minimizes false-negatives to the lowest possible and eliminates false-positives known to be associated with other Lyme disease DNA tests. Symptomatic patients visiting the emergency department or the walk-in center have the best chance for an early diagnosis by this new test. The waiting for a scheduled visit to the doctor's office usually misses the window of opportunity in DNA detection at the time when the bacteria are circulating in the blood of the patient in early Lyme disease, but only briefly, said Dr. Lee.

Dr. Lee is also now collecting data and writing a second report for publication with Jay Walshon, MD, chairman of Emergency Medicine at Milford Hospital and Jessie Williams, MD, of the Milford Hospital Walk-in Urgent Care Center, to summarize their experience. Milford is a suburban city outside of New Haven, in southern Connecticut. The region has about 600,000 people and is located less than an hour from Old Lyme, from which Lyme disease was named.

Lyme disease is endemic in the suburban towns in and around the Milford area, which although located by Long Island Sound, is also in many areas heavily wooded. Dr. Lee's group reported that 25-50% of the engorged deer ticks removed from the human skin bites in this area were found to be infected by the Lyme disease causing spirochetes, Borrelia burgdorferi.

Although the new method based on the nested PCR technology is highly sensitive in detecting Lyme spirochete DNA, a negative result still does not rule out Lyme disease because spirochetemia is transient and its time points in Lyme borreliosis vary from patient to patient, said Dr. Lee.

Dr. Lee said, "untreated or inadequately treated patients may develop tissue damages in the joints, the heart and the nervous system as a result of the bacterial infection. Since there were no reliable laboratory tests to confirm the clinical diagnosis, Lyme disease has been both over-diagnosed and under-diagnosed. Erroneous over-diagnoses of Lyme disease may cause unnecessary use of antibiotics which are associated with serious undesirable side effects in certain patients." Every positive DNA test result at Milford Hospital is confirmed by DNA sequencing, and the diagnostic signature sequence validated by the GenBank database, said Dr. Lee. The GenBank is an on-line database of publicly available DNA sequence data maintained by the National Center for Biotechnology Information (NCBI), a part of the National Institutes of Health (NIH).

The physicians at the Milford Hospital Emergency Center and Walk-in Urgent Care Center, who see about 40,000 patients a year, usually order the traditional antibody testing and the new DNA test for patients presenting with Lyme disease-like symptoms. Most insurance companies except Aetna will pay for the test.

Source
Milford Hospital
sisyphe
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Re: Maladie de Lyme précoce et test ADN

Message par sisyphe »

Since there were no reliable laboratory tests to confirm the clinical diagnosis, Lyme disease has been both over-diagnosed and under-diagnosed. Erroneous over-diagnoses of Lyme disease may cause unnecessary use of antibiotics which are associated with serious undesirable side effects in certain patients
Ben oui, une partie du pb est la !Tous les malades qui n'ont pas de diagnostic "reconnu" ne
souffrent pas necessairement de borreliose active, ca serait trop "beau" (j'entends a l'echelle globale.
A l'echelle individuelle,chacun fait/subit en fonction de ce qu'il constate et de ce qu'il obtient,ca va de soi ! )

En ce qui concerne les PCR ,j'ai été surpris de voir ds le texte du Pr Alain de Weck, qu'"une seule molécule
peut suffire à fausser les résultats" ce qui constituerait "une plaie des laboratoires de PCR"
Des avis initiés sur ce qu'il dit ? :hmm
J'ai vu ca ds le lien que j'ai mis hier sur le forum , je crois

Si ces affirmations sont scientifiquement acceptables , forcément n'importe quel médecin pourrait s'en servir pour mettre
en cause le labo qui prélève , n'est ce pas Léa ? :wink: Sans parler d 'ADN soi disant cicatriciel :roll:
Les lois de probabilités peuvent tjrs s'interpreter !

There have been other PCR tests for early Lyme disease. But this is the first effective one using nested PCR for detection and DNA sequencing to validate the molecular diagnosis, in clinical laboratory medicine. DNA sequencing is accepted as the gold standard for molecular identification, said Dr. Lee.
Il faut esperer que ce nouveau test d'utilisation courante puisse aller ds le sens d'un diagnostic biologique plus fin
et qu'il soit reconnu comme tel .
Le test sera remboursé par les compagnies d'assurances américaines si j 'ai bien compris?
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blz
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Nouveau test ADN pour LYme précoce

Message par blz »

Lu sur le site LymeNet Europe :
Many of the more than 30,000 people a year in the United States with suspected cases of Lyme disease spirochete (bacterial) infection can now take a DNA test developed by a Connecticut scientist/physician and his team that can quickly determine if they test positive for Lyme spirochetes in their blood. This is the first such early Lyme test available, and most insurance companies have already agreed to cover the cost for their members. The scientific medical paper about the advanced test will be printed in the April 2010 edition of the "American Journal of Clinical Pathology... (Source: Health News from Medical News Today)
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alx78
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Re: Maladie de Lyme précoce et test ADN

Message par alx78 »

salut tout le monde!

alors, perso j'ai trop été enthousiaste au début, puis moins en lisant.

on est encore et toujours limité dans la fenêtre de diagnostic.
la durée de la bactériémie est variable, mais a priori courte (quelques jours à quelques semaines), puis à ce que j'ai compris hop! borrelia est déjà dans le système lymphatique.

perso, j'ai eu des ganglions en 18 jours après la tique...
peut-être que c'était fini en 3 semaines la "spirochètémie" (le p'tit mot de ouf, pour se la péter :lol:)


du coup, je vous avoue que je ne vois pas bien la révolution dans cet article...
- une nouvelle technique de pcr (ou plutôt une ancienne déjà connue, nouvellement appliquée à borrelia)?
- ou un nouveau créneau, tout petit, où on peut faire une pcr?
ou un peu des deux, et hop! une parution dans un journal! ça fait toujours du bien au budget de l'équipe!
- ah non, peut-être c'est juste pour dire que le test est reconnu et le grand public y a droit, ça c'est une grande nouvelle!

mais sinon, sisyphe, t'as raison.
la pcr de routine... je pense pas qu'on en soit là encore...

ce qu'évoque le prof de w. c'est vrai: une PCR est très très facilement contaminable.
une pcr amplifie 10 puissance je sais plus combien (24, il me semble) un bout d'adn ou de n'importe quoi qui se trouve là.
tu fais tourner la machine et tu sais même pas si t'as amplifié la séquence que tu cherchais.
souvent, c'est l'adn de celui qui fait la pcr qui se retrouve dedans! pas de la bactérie supposée!
l'adn et des enzymes qui "mangent" l'adn, y en a partout sur tes mains, dans l'air avec tes petites cellules un peu partout...
d'où masque et combinaison, hotte, porte et fenêtres hermétiques pendant la pcr.
et travail laborieux d'hygiène sur toute la chaîne des matériels (cuvette, combinaison, gants, carton où sont les gants... bref un truc à rendre dingue) pour espérer avoir un résultat fiable.

sans compter le matériel: celui de base.
et celui qu'il faut commander et renouveler à chaque batterie de tests: super cher

et le personnel compétent: cher aussi

bref, beaucoup de fric pour une procédure super faillible...
d'où: l'accès au grand public pour tests de routine est, à l'heure qu'il est, souvent infaisable.
c'est généralement réservé à la recherche ou à faire dans des labos équipés et ayant les standards pour la recherche.

sinon dans l'article, ils disent qu'ils re-séquencent le fragment après PCR, c'est très bien.
une précaution et (du coût!) en plus pour être sûr que la pcr a marché...

voilà, voilà...
donc je ne suis pas emballée, pour résumer...

biz!
alx
sisyphe
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Re: Maladie de Lyme précoce et test ADN

Message par sisyphe »

alx78 a écrit : on est encore et toujours limité dans la fenêtre de diagnostic.
la durée de la bactériémie est variable, mais a priori courte (quelques jours à quelques semaines)
Oui, j'ai du mal à comprendre comment la sensibilité peut etre améliorée si il n'y a plus de Bb ds la
circulation sanguine? :shock:
Peut etre y a t il besoin d'une plus petite quantité d'ADN pour cette nouvelle génération de
tests?
Je m'étais également demandé prq ne pas rechercher directement l'antigene plutot que les anticorps ...meme réponse :
"peu/pas présents ds le sang"
peut-être que c'était fini en 3 semaines la "spirochètémie"
C'est quoi Lyme précoce? jusqqu'à séroconversion....et s'il n'y a pas séroconversion,on n'est plus ds le precoce
à partitr de qd ? :hmm
L'article précise que ML est a la fois sur et sous diagnostiquée, mais en mm temps qu'une PCR négative n'exclut pas ML,
dc on reste ds des chiffres.Je me suis tjrs demandé qui fixe les pourcentages de sensibilté et de specificité
des tests biologiques ,et comment etre sur d'une fausse séronégativité ou positivité ? Sur une base clinique?
L'extrait ne précise pas l'échantillon de population sur lequel il se base.
Certains ont tranché la question et revisitent eux meme les criteres :lol:

souvent, c'est l'adn de celui qui fait la pcr qui se retrouve dedans! pas de la bactérie supposée!
Ds ce cas la PCR est faussement négative pr cette bacterie, c 'est ca?
Je comprends grossierement les bases d'une PCR mais j'ai du mal a saisir les subtilités techniques
Une PCR faussement positive proviendrait d'un "bout" d'ADN de Bb qui viendrait s'insinuer qq part
ds la chaine, ou alors c 'est à nouveau des pb de spécificité et n'importe quelle molécule peut
modifier le "matériau" et ,apres amplification ,aboutir à un ADN
faussement ressemblant à celui de Bb ?
Pr la justice , ils nous sortent du quasi 100%.Tu penses que c 'est une facade ou que c'est une question de moyens ?
Ceci dit , on peut transporter l'ADN de qui on veut ou on veut , dc pour ce qui est des fausses preuves ... :roll:
sinon dans l'article, ils disent qu'ils re-séquencent le fragment après PCR, c'est très bien.
Ca consiste en quoi le re-séquencage? :hmm
Cade
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Re: Maladie de Lyme précoce et test DNA

Message par Cade »

Bonjour,
Qu'en est il de cette article ? On doit avoir maintenant des résultats ou tests moins faillibles non ?
Le test ADN est-il toujours pertinent ?

:quoi nouvelle et perdue ! (j'ai beaucoup entendu de test ADN pour la maladie de Lyme mais doute encore de l'intérêt)
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