Forum Lyme Francophone

[lea]

Bonjour,

Considéré maintenant dans certains pays européens comme hautement spécifique...un Test ELISpot pour borrélia :

""Test de détection de réponses cellulaires par ELISpot
Principe
L'activation et l'expansion des lymphocytes T spécifiques à un antigène peuvent avoir lieu suite à une infection virale ou bactérienne primaire ou suite à une immunisation (vaccin). Lorsque les lymphocytes T CD8 et CD4 sont, une seconde fois, mis en présence des antigènes cela mène à la sécrétion d'interféron- (IFN- ). Le principe de l'ELISpot est de mesurer les réponses cellulaires spécifiques à un antigène en quantifiant le nombre de cellules T produisant de l'IFN- . Le type d'antigène utilisé détermine le type de réponse sollicitée. En effet, des antigènes de type protéinique ou lysat activeront des réponses T CD4 tandis que des antigènes de type peptidique activeront des réponses T CD8. Cependant, les réponses peptides-spécifiques sont restreintes aux différents HLA (cf. tableau ci-dessous).
La sensibilité du test ELISpot permet de détecter une cellule spécifique à un antigène sur 10'000 lymphocytes.""

Ceci est un texte français où dans l'énumération des infections, la borrélia n'est pas de mise....

A quand, une concertation européenne???? au-delà des intêrets des lobbies pharmaceutiques (tiques) ou autres??

la première info date de printemps 2006!!!
sous le nom de ELISpot "Enzyme Linked Immunospot Assay)

Ensuite un article du BorrélioseMagazin (bulletin trimestriel de l'association allemande) d'octobre 2006 relate les différentes prises de considération et critiques de divers médecin, en analysant le pour et contre...

[lea]

Deux labos en Allemagne le réalisent..l'un à Berlin, l'autre à Mayence.

Je suis en relation avec deux personnes qui l'ont réalisé..avec beaucoup de symptômes ..sérologe négatives..l'une ..résultat positif, l'autre négatif...
Certaines "pointures" le tiennent comme plus performant que le LTT.
Cout environ : 100 euros

[Framboise]

"Dans le laboratoire : Institut für Medizinische Diagnostik il existe un test pour la borrélia qui est différent d’une sérologie et d’une PCR. Il s’agit du test Lymphocytes Transformation Test Borrelia (LTT-Borrelien). Ce test est basé sur la détection de la transformation des lymphocytes qui ont rencontré une borrélia. Le test coûte environ 157 euros.
Il faut demander un kit de prélèvement au laboratoire. Le test doit être fait dans les 24 heures suivant la prise de sang.
L’adresse est :
Institüt für Medizinishe Diagnostik
Nicolai strasse 22
12247 Berlin-Steglitz
Allemagne

mail : info@IDM-Berlin.de"
Le site web du laboratoire est : http://www.imd-berlin.de/

D´apres le Dr Hopf-Seidel ce serait le test le plus fiable pour prouver une infection de borrelies active.

Utile egalement pour controller l´efficacite de la therapie antibiotique.

Si il y a infection,il est positif des le 10e jour apres la piqure.

Par contre,il n´est pas fiable si on prend un AB avant.Dans ce cas,il faut attendre 4 a 6 semaines apres la fin de l´ABtherapie,pour verifier l´efficacite de la therapie.

http://www.eclipx.ch/lyme/documents/ou_ ... _tests.doc

[Nina26]

LTT=test de transformation lymphocytaire.

Le test est utilise en Allemagne par des specialistes de la borreliose (comme les medecins membres de la Societe Allemande de la Borreliose:Deutsche Borreliose Gesellschaft) pour diagnostiquer une borreliose .

Il teste la reaction des lymphocytes T contre les borrelies.

Ses avantages par rapport aux tests serologiques:

1) en cas de borreliose precoce il est positif a partir du 10 eme jour apres la piqure de tique,tandis que les tests ELISA et WB ne sont positifs qu´au bout de 4 a 8 semaines.Il permet donc en cas d´absence d´EM d´avoir un diagnostique et donc un traitement plus precoce,ce qui augmente les chances de guerison.Le Dr Berghoff disait en effet pendant la conference de presse sur la borreliose en aout 2008 (organisateurs:Deutsche Borreliose Gesellschaft+Deutscher Borreliose Bund) que 80% des infectes,qui n´ont pas recu de traitement antibiotique efficace pendant les 4 premieres semaines apres une piqure de tique ,developpent une borreliose chronique!Ce chiffre souligne donc l´importance de soigner la borreliose le plus tot possible apres une piqure.Pour eviter de perdre du temps precieux,le Dr Hopf-Seidel recommande donc de faire le LTT des le 10 eme jour apres la piqure et de prendre l´antibiotique le jour meme du LTT (apres la prise de sang).Le laboratoire a besoin d´environ 2 semaines pour avoir un resultat.

2)Il indique si il y a une reponse cellulaire (lymphocytes T) aux borrelies,donc s´il y a une activite actuelle du systeme immunitaire contre des borrelies,alors que les tests serologiques ELISA et WESTERNBLOT n´indiquent que la reponse humorale (anticorps),n´indiquent donc pas si le systeme immunitaire est actif contre les borrelies au moment du test (les anticorps IgM et surtout IgG peuvent persister tres longtemps apres le debut de l´infection,meme si celle-ci a ete eradiquee par le systeme immunitaire ou au contraire disparaitre completement,meme si des borrelies sont encore presentes dans l´organisme).

3) Il indique en cas de borreliose seronegative (il y a des patients qui ne developpent jamais d´anticorps contre les borrelies) si le systeme immunitaire est actif contre les borrelies.

4)Le resultat indique s´il y a une reponse immunitaire cellulaire contre les 3 souches de borrelies:Borrelia burdgdorferi,Borrelia garinii,Borrelia afzelii.

Remarques:

1)le LTT peut etre faussement negatif pendant une antibiose.
Pour cette raison il ne peut etre fait que 6 semaines au plus tot apres la fin d´une antibiose.

2)en cas de borreliose chronique avec immunosuppression (CD 57 bas) le LTT peut etre negatif.Le systeme immunitaire cellulaire est alors trop faible pour repondre de maniere suffisante a l´infection.(Dr.Hopf-Seidel,Vortrag Berlin 2007)

Adresses de laboratoires ou le LTT (Lymphozytentransformationstest) peut -etre fait (recommandations du Dr Hopf-Seidel,neurologue allemande specialiste de la borreliose,membre de la Societe Allemande de la Borreliose):

Institut für Medizinische Diagnostik
Nicolaistr. 22
12247 Berlin
Tel:
030/77001-220

(le laboratoire fait aussi un Yersinien LTT)

http://www.imd-berlin.de/

Laborzentrum Ettlingen-Karlsruhe
Otto-Hahn-Str. 18
76275 Ettlingen
Tel:
07243/51601

http://www.laborzentrum.org/

(Borrelien+Ehrlichien LTT:ca. 93 € en tout)

Labor Laser
An der Wachsfabrik 25
50996 Köln
Tel:
02336/3911-0

http://www.labor-koeln.de/


Labor Sandkamp
Friedrich-Karls-Str 22
28205 Bremen
Tel:
0421/43070

http://www.ladr.de/labor/lvo/bremen/kontakt.php

Remarque:il faut demander un set de tubes au laboratoire avant la prise de sang.Un courrier vient chercher le set a domicile ou au cabinet medical le jour meme,car le sang doit etre analyse dans les 24 h apres la prise de sang pour etre valable.

Etudes en anglais:

Evaluation of the diagnostic significance of the lymphocyte proliferation test in patients with Lyme borreliosis

Borrelia-specific antibodies are not detectable until several weeks after infection and their presence alone is not proof of an active infection.

The sensitivity of culture methods and PCR for the confirmation or exclusion of Lyme borreliosis is too low.

Therefore, a method is required that detects an active Borrelia infection as early as possible.

For this purpose, a lymphocyte proliferation test (LPT) using three endogenous Borrelia antigens (Borrelia burgdorferi sensu stricto, Borrelia afzelii, and Borrelia garinii) and recombinant OspC was developed and validated by investigating seronegative (n=100) and seropositive (n=36) healthy individuals, as well as seropositive (n=44) patients with clinically overt borreliosis.

The sensitivity of the Borrelia LPT in clinical borreliosis before the administration of antibiotic treatment was 91%, while the specificity was 94%.

In 820 patients with clinical suspicion of borreliosis, positive and negative results by serology and LPT were in agreement in 77.3% of cases.

Some 165 patients (20.1%) were serologically positive and negative by LPT. These were mainly patients with borreliosis after antibiotic therapy.

Furthermore, 21 patients (2.6%) had negative serology and a positive LPT result, seven of whom had erythema migrans.

Following antibiotic treatment, the LPT becomes negative or borderline in patients with early manifestations of borreliosis, whereas in patients with late symptoms it demonstrates a regression while remaining positive.

Follow-up investigations over a period of 1 year yielded one reactivation among six patients with early manifestations, in contrast to eight out of ten patients with late symptomatology that exhibited frequent episodes of reactivation and/or persistently positive LPT reactions.

Therefore, we propose follow-up monitoring of disseminated Borrelia infections as the main indication for the Borrelia LPT.

http://www.reference-global.com/doi/abs ... M.2007.023

Seronegative Lyme disease Dissociation of specific T-and B- lymphocyte responses to Borrelia burgdorferi

RJ Dattwyler, DJ Volkman, BJ Luft, JJ Halperin, J Thomas, and MG Golightly
The diagnosis of Lyme disease often depends on the measurement of serum antibodies to Borrelia burgdorferi, the spirochete that causes this disorder.

Although prompt treatment with antibiotics may abrogate the antibody response to the infection, symptoms persist in some patients.

We studied 17 patients who had presented with acute Lyme disease and received prompt treatment with oral antibiotics, but in whom chronic Lyme disease subsequently developed.

Although these patients had clinically active disease, none had diagnostic levels of antibodies to B. burgdorferi on either a standard enzyme-linked immunosorbent assay or immunofluorescence assay.

On Western blot analysis, the level of immunoglobulin reactivity against B. burgdorferi in serum from these patients was no greater than that in serum from normal controls.

The patients had a vigorous T-cell proliferative response to whole B. burgdorferi, with a mean ( +/- SEM) stimulation index of 17.8 +/- 3.3, similar to that (15.8 +/- 3.2) in 18 patients with chronic Lyme disease who had detectable antibodies.

The T-cell response of both groups was greater than that of a control group of healthy subjects (3.1 +/- 0.5; P less than 0.001).

We conclude that the presence of chronic Lyme disease cannot be excluded by the absence of antibodies against B. burgdorferi and that a specific T-cell blastogenic response to B. burgdorferi is evidence of infection in seronegative patients with clinical indications of chronic Lyme disease.

Volume 319:1441-1446 December 1, 1988 Number 22

The Nex England Journal of Medicine

http://content.nejm.org/cgi/content/short/319/22/1441

->Je ne suis pas medecin.Les informations ci-dessus sont issues de mes recherches personelles sur Internet,sans garantie de fiabilitite.Je n´assume pas de responsabilite pour les consequences issues de la lecture de ces informations.

[Marsu]

Et ce test est reconnu en France ? Parce que si ça sert à rien pour avoir un traitement ici…

[Nina26]

Je ne pense pas Marsu.Ce test n´est pas reconnu en Allemagne par la plupart des medecins (malheureusement ceux qui sont d´avis que la borreliose chronique n´existe pas et qui dominent l´opinion publique meme s´ils ne connaissent rien a Lyme!) et par les caisses d´assurance maladie,donc il n´est pas rembourse par elles.Il est reconnu seulement par certains medecins comme les membres de la Societe Allemande de la Borreliose (Deutsche Borreliose Gesellschaft) qui le recommande dans son consensus de 2008.

Donc un Lyme avec une serologie negative,mais un LTT positif aura tres probablement du mal a trouver un medecin francais qui acceptera de lui prescrire un traitement antibiotique sur la base de ce diagnostique.

Mais il reste toujours la possibilite de convaincre son medecin du bien-fonde de ce test et celle de se faire traiter par un specialiste allemand,si l´etat financier le permet.

[Léa]

désolée Nina

de te contredire

Voilà ce que dit le consencus de ces scientifiques :

.
Au cas où aucun résultat positif de culture ou de PCR-borrélia ne serait présent, un indice peut être obtenu avec le LTT-borrélia, à savoir si dans ce cas concret, il pourrait s’agir d’une infection actuellement active. Il convient toutefois de tenir compte du fait qu'un résultat positif du LTT-borrélia engendre une très haute probabilité, mais n'est pas une preuve qu'il y ait une infection de borréliose active (c'est seulement la preuve qu'il y a des agents pathogènes).

Le reste va suivre sous peu!!!

Léa

[lali]

T'es sur qu'ils savent identifier des lymphocytes T spécifiques à la borrélies?

Ils doivent porter un nom?

[Nina26]

Il convient toutefois de tenir compte du fait qu'un résultat positif du LTT-borrélia engendre une très haute probabilité, mais n'est pas une preuve qu'il y ait une infection de borréliose active (c'est seulement la preuve qu'il y a des agents pathogènes).

Tu ne m´as pas bien lu Lea:je n´ai pas ecrit qu´un LTT positif soit une preuve d´une borreliose active.

[vero]

T'es sur qu'ils savent identifier des lymphocytes T spécifiques à la borrélies?

en tapant : lymphocytes T spécifiques à la borrélies
dans google , on trouve plusieurs sites ou articles
un extrait trouvé ici ( mais il y en a d'autre , en français ):
http://titan.medhyg.ch/mh/formation/pri ... ?sid=31226

Test de stimulation des lymphocytes

Ce test mesure l'immunité cellulaire face à un agent pathogène donné. La réponse immunitaire cellulaire peut débuter avant même la séroconversion.25,26 A cet effet on incube des lymphocytes périphériques avec Borrelia burgdorferi. Après quatre à cinq jours on mesure et on compare l'incorporation de la thymidine tritiée (marquée radioactivement) dans les lymphocytes stimulés et non stimulés du patient. Les résultats sont contradictoires et semblent peu spécifiques. Des réactions surviennent en effet chez des sujets contrôles sains et séronégatifs, ainsi que chez des nouveau-nés de mère séronégative.27 Ces résultats faussement positifs sont imputables à des réactions croisées avec d'autres agents pathogènes.28 La sensibilité et la spécificité se situent entre 45 et 95%.29,30 Le test n'est pas non plus prédictif de l'activité, de l'évolution ou du pronostic de la BL.26,30,31

[Nina26]

Les résultats sont contradictoires et semblent peu spécifiques. Des réactions surviennent en effet chez des sujets contrôles sains et séronégatifs, ainsi que chez des nouveau-nés de mère séronégative.27 Ces résultats faussement positifs sont imputables à des réactions croisées avec d'autres agents pathogènes.28 La sensibilité et la spécificité se situent entre 45 et 95%.29,30

Ca c´est ce que pretendent des medecins qui refusent d´admettre l´existence d´une Lyme chronique,qui affirment qu´une borreliose n´est pas possible si ELISA et/ou WB sont negatifs,bref qui suivent les recommandations de l´IDSA.

Bien sur le LTT n´est-comme TOUS les tests!!!-pas sur a 100%,des resultats faussement positifs ou faussement negatifs sont egalement possibles.Mais d´apres les etudes du Prof.von Baehr,c´est un test aussi fiable que le ELISA ou le BLOT:

http://www.aerztekammer-bw.de/25/15medizin08/B30/1.pdf

Page 17

Page 20:Validite du LTT

Einen zusätzlichen Hinweis bei zweifelhafter negativer Serologie, aber auch bei vermeintlicher „Serumnarbe“, kann laut Gebhardt der von Stricker und Winger 2001 in den „Immunological Letters“ vorgestellte CD 57-Test (Expression auf Natural-Killer-Zellen) geben, der allerdings auch bei den viralen (Ko-) Infektionen positiv anzeigen kann. Zunächst wird man daher dem Lymphozytentransformationstest (LTT) den Vorzug geben, bei dem Patientenzellen (Lymphozyten) mit gereinigten Borrelienantigenen stimuliert werden. Finden sich T-Zellen mit spezifischen Rezeptoren („Memory-Zellen“), spricht dies für eine aktuelle Auseinandersetzung des Immunsystems mit Borrelien, also für eine aktive Infektion. Professor Rüdiger von Baehr vom Berliner Institut für medizinische Diagnostik (http://www.IMD-Berlin.de) stellte seine Studie zum Vergleich von Serologie und LTT vor, die eine Übereinstimmung der Ergebnisse von 76 Prozent ergab. Fiel der LTT bei positiver Serologie negativ aus, handelte es sich in der Regel um nach Antibiose weitgehend beschwerdefreie Patienten (Serumnarbe).

(…)

Die verbreitete Kritik am LTT beruht laut von Baehr meist auf dem Fehlen eigener Erfahrungen und überholten Argumenten. Das Verfahren sei inzwischen intensiv weiterentwickelt worden und zumindest nach den vorgetragenen Ergebnissen des Berliner Labors umfangreich validiert, mit den verschiedensten klinischen Bildern der Borreliose verglichen und somit als diagnostische Methode für eine aktive Borreliose, zur Erfolgsbeurteilung der antibiotischen Behandlung und zum Nachweis einer Reaktivierung als wertvoll erwiesen.

Auch die Professorin Dr. Bettina Wilske vom Nationalen Referenzzentrum Borrelien im Münchener Pettenkofer-Institut betrachte den LTT inzwischen als „leistungsfähige Methode“. Die Serologie habe sich dagegen für die kurzfristige Verlaufsbeurteilung einer Borreliose als nicht geeignet gezeigt.

Allerdings ist es für den LTT neben der qualifizierten Durchführung wichtig, dass die Zellen nach möglichst kurzem Transport - am sichersten durch einen Abholservice - bei moderater Temperatur lebend im Labor ankommen.

http://www.borreliosemagazin.de/cms/mod ... int&sid=39

Je n´ai pas le temps de traduire ce texte en allemand.J´essaierais de le faire plus tard (Anne,Léa:pourriez-vous le faire pour moi?).

Le test n'est pas non plus prédictif de l'activité, de l'évolution ou du pronostic de la BL.26,30,31

Il y a des specialistes allemands qui l´utilisent pour controller l´efficacite d´une antibiose (ce qu´on ne peut faire que 6 semaines apres la fin d´une antibiose).A ce sujet,beaucoup de malades sont sceptiques.Sur le forum allemand il y a beaucoup de malades qui pretendent qu´ils avaient apres une antibiose un LTT negatif ,mais avaient quand meme des symptomes.Mais cela peut etre du au fait que le LTT a ete fait trop tot apres la fin de l´antibiose (certains medecins font le LTT pendant l´antibiose und seulement 4 semaines apres la fin,ce qui est trop tot) ou les symptomes persistants ne sont pas dus aux borrelies mais a d´autres bacteries (co-infections).Ou alors -si cette these est vrai,ce dont je doute-les symptomes persistants sont dus a un phenomene inflammatoire d´origine autoimmune (douleurs articulaires et musculaires par exemple).

Tout ce que je peux dire,c´est que le LTT est un diagnostique precieux pour les malades seronegatifs,surtout en phase precoce.Enn phase chronique il est moins fiable en raison de la possibilite d´une immunosuppression (baisse des lymphocytes CD57) due a la borreliose.

[lali]

Il faut tout prendre dans les tests en faveur d'un diag lyme, bien sur...

Mais dans les non payés, je préfère celui des cd 57.

J'ai tjrs du mal à croire à ce LTT surtout sur la spécificité de la différenciation des lymphocytesT.

[Nina26]

Je pense qu´en cas de Lyme chronique (>6 mois) il faudrait faire les deux tests,CD57 et LTT,au cas ou le LTT serait negatif a cause d´une baisse des CD 57.

En theorie on aurait donc les deux possibilites de resultats indiquant une borreliose active:

*CD57 normal+LTT positif
ou
*CD 57 bas+LTT negatif

Si un medecin ne mesure que le CD 57 et que celui-ci est normal,le risque est grand qu´il en conclut que le malade n´a pas de borreliose.

Je pense donc que le LTT augmente les chances de faire le bon diagnostique si on le fait en meme temps que le CD 57.

[Sociando]

Nina26,

Peux tu nous expliquer l'intérêt d'utiliser un test qui ne revendique "que" desfois 45% de sensibilité ou de spécificité ?

Ou autrement dit, quelle est l'intérêt d'utiliser un marqueur ou jusqu'à 50% des gens "sains" sont trouvées positifs ???

Soc

[Nina26]

Sociando,d´apres l´etude du Prof.von Baehr,la sensibilite est 91%,la specificite de 94%:

The sensitivity of the Borrelia LPT in clinical borreliosis before the administration of antibiotic treatment was 91%, while the specificity was 94%.

In 820 patients with clinical suspicion of borreliosis, positive and negative results by serology and LPT were in agreement in 77.3% of cases.

Le Prof.von Baehr utilise une methode qui constitue une amelioration par rapport aux tests utilises par d´autres laboratoires precedement (d´ou les resultats plus mediocres).

Quant a l´interet du LTT:relit le premiere post,je l´ai indique assez precisement.